Luminescentna mikroskopija: karakteristike proučavanja

Sadržaj:

Luminescentna mikroskopija: karakteristike proučavanja
Luminescentna mikroskopija: karakteristike proučavanja
Anonim

Izraz "mikroskopija" ima grčke korijene. U prijevodu, to znači proučavanje objekata pomoću instrumenata visoke preciznosti. Nedavno su fluorescentna i elektronska mikroskopija postale sve popularnije.

fluorescentna mikroskopija
fluorescentna mikroskopija

Rezolucija

Pod njim, u pravilu, razumiju minimalnu udaljenost na kojoj se mogu locirati jasno prepoznatljivi objekti. Stupanj prodora u mikroskopski svijet, sposobnost razmatranja veličine elementa koji se proučava ovisit će o rezoluciji opreme. Pri velikom povećanju, granice objekata se mogu spojiti. Shodno tome, postoje određene granice izvan kojih je aproksimacija elemenata besmislena.

Metoda luminiscentne mikroskopije: mehanizam

Kada se energija koju apsorbuje supstanca pretvori u vidljivo zračenje, nastaje sjaj. Zove se luminiscencija. Ovaj fenomen je zbog činjenice da neke supstance pod uticajem svetlosti počinju da emituju zrake različite (obično velike) talasne dužine. Osim toga, neki objekti koji pod normalnom rasvjetom imaju određenuboje, pod uticajem ultraljubičastog menjaju boju.

metoda fluorescentne mikroskopije
metoda fluorescentne mikroskopije

Specifičnosti

Predmet koji se ne može vidjeti pod ultraljubičastim svjetlom može emitovati sjajan sjaj ako se tretira posebnom supstancom. U njemu elementi svijetle u različitim bojama u mraku. Jačina zračenja je različita, ali je u pravilu mala. U tom smislu, fluorescentna mikroskopija je efikasna u zamračenoj prostoriji. Kada se koristi ova vrsta studije, objekt se posmatra u svjetlu koje sam emituje. Hemijski sastav tkiva, ćelija će uticati na kvalitet studije. Fluorescentna mikroskopija se u određenoj mjeri smatra histohemijskom studijom.

Klasifikacija

Fluorescentna mikroskopija može biti primarna ili sekundarna. U potonjem slučaju, predmet se obrađuje posebnim spojevima koji daju sjaj. Primarna fluorescentna mikroskopija zasniva se na vlastitoj sposobnosti elementa da emituje svjetlost.

fluorescentna i elektronska mikroskopija
fluorescentna i elektronska mikroskopija

Oprema

Fluorescentna mikroskopija se izvodi pomoću raznih uređaja. Njihov glavni element je iluminator. Opremljen je UV lampom. Osim toga, uređaji koriste set filtera. U nekim uređajima postoji dosta različitih konfiguracija. U zavisnosti od toga koja boja se koristi za pobuđivanje luminescencije - ultraljubičasta ili plava, između izvora svjetlosti i predmeta koji se proučava postavlja se odgovarajući filter. Budući da je sjaj mikroskopskog elementa energetski slabiji od uzbudljivog svjetla, on će biti uhvaćen samo pod jednim uvjetom. Višak zraka iz izvora mora biti odsječen žuto-zelenim filterom. Nalazi se na okularu uređaja. Najizraženiji efekat luminiscencije biće kada filter potpuno odseče zrake koje izlaze iz izvora svetlosti.

Od čega se sastoji instalacija vidljivog svjetla? Sadrži izvor jakog svjetla i biološki mikroskop. Između ogledala uređaja i lampe postavljen je plavo-ljubičasti filter. To može biti FS-1, UFS-3 i tako dalje. Žuti filter se stavlja na okular mikroskopa. Uz njihovu pomoć, plavo-ljubičasta svjetlost pada na objekt. Pobuđuje luminiscenciju. Ali ovo svjetlo može ometati viđenje sjaja. Stoga je na putu do oka odsječe žuti filter. Rasvjeta je postavljena po Koehler metodi, sa jednim izuzetkom. Dijafragma kondenzatora mora biti potpuno otvorena. Prilikom pregleda važno je koristiti nefluorescentno ulje za uranjanje. Da bi se smanjio vlastiti sjaj, dodaje mu se nitrobenzen (2-10 kapi / 1 g).

primjena fluorescentne mikroskopije
primjena fluorescentne mikroskopije

Luminescentna mikroskopija: primjene u mikrobiologiji

Prednosti ove vrste studija su:

  1. Mogućnost slikanja u boji.
  2. Samoemitujući elementi visokog kontrasta na crnoj pozadini.
  3. Detekcija i lokalizacija određenih vrsta virusa i mikroba.
  4. Mogućnost proučavanja transparentnog i neprozirnogživi organizmi.
  5. Proučavanje životnih procesa u njihovoj dinamici.

Treba reći i da luminescentna mikroskopija doprinosi razvoju najfinijih metoda histo- i citohemije, ekspresnoj dijagnostici.

Preporučuje se: