Ovaj članak će biti posvećen fenomenu reakcije padavina. Ovdje ćemo razmotriti karakteristike formulacije ovog fenomena, fenomen difuzije, opšte karakteristike, ulogu u ljudskom životu i još mnogo toga.
Uvod u fenomen
Precipitacija je fenomen serološkog tipa, tokom kojeg rastvorljivi antigeni stupaju u interakciju sa antitelima i, kao rezultat toga, primećuje se precipitacija - talog.
Opšta karakteristika precipitacione reakcije je oblik koordiniran uticaj antigena i antitela. Ove vrste interakcija omogućavaju određivanje prisutnosti nepoznatih antigena u ispitivanoj supstanci dodavanjem poznatih antitijela i antigena. Proces taloženja bez prisustva soli će teći lošije, a najbolji optimum je u rasponu od 7,0-7,4 pH.
Sastavnici reakcije
Postoje tri glavna elementa među komponentama reakcije padavina:
- Antigen koji ima molekularnu prirodu. U stanju je finog tipa, drugim riječima, torastvorljiv. Takođe, takav antigen se naziva precipitogen, što je lizat ili ekstrakt tkiva, itd. Precipitogen ima karakterističnu razliku od aglutinogena, koja leži u veličini čestica od kojih se sastoji. Aglutinogen ima inherentnu veličinu ćelije, a precipitogeni su proporcionalni veličini molekula. Rastvor antigena karakteriše transparentnost.
- Antitelo pronađeno u ljudskom krvnom serumu, kao iu imuno dijagnostičkom serumu, koji sadrži proučavana antitela.
- Elektroliti su rastvori natrijum hlorida koji su izotonični.
Proizvodnja precipitogena
Postavljanje precipitacijske reakcije nemoguće je bez precipitogena, koji se dobija mlevenjem materijala i izdvajanjem proteinskih antigena iz njih. Ekstrakcija se vrši kuhanjem ili drugim metodama.
Lizati, kao i ekstrakti tkiva i organa, krvni serum, razne vrste filtrata na bazi mikrobnih bujonskih kultura, kao i solni ekstrakti mikroorganizama i autolizatnih supstanci su upečatljivi primjer precipitogena.
Postavljanje u slučaju padavina
Sada razmotrimo način postavljanja reakcije taloženja.
Izvodi se prstenasta reakcija taloženja koja se odvija u posebno pripremljenim epruvetama. Serum se unosi u šupljinu posuđa, sipajući ga preko zida uz pomoć pipete. Zatim se odgovarajuća količina taloga pažljivo nanese na vrh, a zatim se cijev iz horizontalnog dovede u vertikalni položaj. Postavljanje i uzimanje u obzir reakcije padavina je vrlo pedantna operacija. Rezultat se bilježi nakon pojave bijelog prstena na granici između antigena i antitijela. Ako reagujući elementi reakcije odgovaraju jedni drugima, onda se vezuju, ali to postaje vidljivo nakon dužeg vremenskog perioda njihove interakcije
Reakcija taloženja se takođe izvodi u Petrijevoj posudi ili na čaši stakalca, na koje se prenosi agar gel, nanoseći ga u malom sloju. Nakon što se stvrdne u gelu, izrezuje se mali broj jažica u koje će se stavljati antigeni i antitela. Postoje dva načina za izvođenje ove akcije: metoda radijalne imunodifuzije i dvostruke imunodifuzije.
Opće informacije
Mehanika rada padavina je slična uređaju za aglutinaciju. Pod uticajem seruma imunog tipa, antigen, koji je već ušao u reakciju, smanjuje stepen svoje disperznosti. Važan uslov je transparentnost i seruma i antigena.
Možete poboljšati registraciju reakcije ako antigene postavite na antitela. Kao rezultat toga, može se uočiti pojava taloga u obliku prstena. Ova pojava se naziva prstenasta precipitacija i izvodi se u posebnim cijevima prečnika od 2,5 do 3,5 mm. Jedan od najčešćih primjera precipitacijske reakcije je dijagnoza antraksa.
Precipitacija omogućava određivanje nivoa toksičnosti kulture difterije u agaru.
Tokom reakcije koja se razmatradolazi do precipitacije antigenskih kompleksa i antitijela. Precipitacija je imunološki fenomen koji vam omogućava da odredite količinu antitijela u krvnom serumu bolesne ili vakcinisane osobe i životinje.
Posljedica titracije
Važno je znati da se podaci dobijeni titracijom gornje metode ne mogu kvantificirati. Da bi se napravila i analizirala kvantitativna procjena sadržanog broja antitijela, M. Heidelberger i E. Kabat razvili su posebnu tehniku reakcije koja se zasniva na pretraživanju i identifikaciji zone ekvivalencije. Miješanje starosnog broja antigena sa konstantnom zapreminom antiseruma dovodi do povećanja prvobitno formiranog precipitata, a zatim se opet smanjuje zbog povećanja sposobnosti rastvaranja kompleksa antigena. Određivanjem količine antitijela u supernatantima sadržanim u svakoj epruveti, možete ustanoviti da će određenom broju posuda s antitijelima nedostajati tekućina. Ovdje će se, u poređenju sa drugim epruvetama, formirati najveći talog. Zahvaljujući tome i oduzimanju taloga antigenskog proteina od ukupne vrednosti proteina, moguće je dobiti tačnu vrednost antitela sadržanih u zapremini specifičnog seruma koji se proučava. Nadalje, količina proteinskih molekula precipitata određena je količinom dušika ili kolorimetrijskim metodama.
Procjena vrijednosti
Procjena vrijednosti precipitacije u dijagnostičkoj metodologiji treba uzeti u obzir mogućnost prisustva u imunološkom serumu antitijela koje nema svojstvo precipitina, iz čega proizlazi da sam precipitat možda neće biti nastaje nakon reakcije sa antigenima. Na listi takvih molekula nalaze se nepotpuna antitijela i neke vrste iz grupe gama-A globulina.
Reakcija taloženja u laboratorijskim uslovima nalazi svoju primenu u raznim vrstama modifikacija. Na primjer, reakcija termoprecipitacije se koristi za otkrivanje bakterijskih antigena botulizma, antraksa itd., koji ne prolaze termičku denaturaciju. Za razliku od prstenaste precipitacije, ova vrsta reakcije koristi filtrate dotičnog materijala u prokuvanom stanju.
Analiza reakcije taloženja u složenoj smeši ne dozvoljava da se okarakterišu svojstva pojedinih elemenata smeše. U takvim slučajevima osoba pribjegava metodi precipitacije u agaru, a koristi i imunoelektroferezu.
Difuzne padavine
U ovoj oblasti istraživanja postoji koncept reakcije difuzne precipitacije (RPD). Zasniva se na sposobnosti difuzije u gelu antitela i rastvorljivih antigena. Difuzija je sposobnost molekula određene supstance da prodre u molekule druge, što je uzrokovano termičkim kretanjem.
Gel je sistem dispergovanog tipa u kojem je tečna faza ravnomjerno raspoređena u čvrstoj fazi. Za takvu reakciju najčešće se koristi agar gel.
Nakon davanja parametara, uuslovima pod kojima se molekuli mogu difundirati jedni u odnosu na druge, njihov susret će biti praćen formiranjem kompleksa antigen + antitijelo. Takva neoplazma može se difundirati, nalazeći se u samom gelu, i taložit će se u obliku trake koja se može otkriti golim okom. Ako su antigen i antitijelo homologni, neće se formirati traka.
Stvaranje uslova pod kojima će se odvijati difuzija u sloju agara uključuje sipanje komponenti, ali ukupan broj jažica i njihov relativni položaj određuju se vrstu zadatka koji je potreban odlučuje. RPD daje osobi mogućnost da otkrije i identifikuje nepoznate izolovane viruse testiranjem korištenjem poznatih seruma antitijela.
Prijava
Precipitacija se široko koristi ne samo u dijagnostici bolesti, već svoju primjenu nalazi iu forenzičkom medicinskom pregledu. Teško je zamisliti analizu u kojoj je moguće utvrditi vrstu krvi, dio organa ili tkiva koji se nalazi na zločinačkom oružju, a koja ne koristi reakciju precipitacije. Tokom ovog procesa koriste se precipitirajući serumi, koji se dobijaju imunizacijom raznih životinja i ptica. Važno je da nivo titra u serumu nije manji od 1:10000, a mora imati i dovoljnu specifičnost. Od otkrivene mrlje krvi ili njene kore pravi se ekstrakt za fizikalnu. rješenje kojem će se dalje izlagatiprecipitirajući serum. Prema ovoj reakciji moguće je utvrditi vrste proteina tkiva i organa kako ljudi tako i životinja. Dobijanje mutnih ekstrakata prisiljava nas da pribjegnemo taloženju na agaru.
Zaključci
Analizirajući pročitane informacije, možemo zaključiti da su reakcije precipitacije izuzetno važne za osobu, jer omogućavaju dijagnosticiranje različitih antigena korištenjem antitijela, ovaj fenomen se također široko koristi u forenzičkom medicinskom pregledu i omogućava vam da identifikujete vrstu krv, tkivo ili organ u odnosu na određeni subjekt. Postoji nekoliko vrsta i metoda padavina koje se koriste u skladu sa nastalim potrebama problema koji se rješava.
