Selenite bujon je medij za obogaćivanje sa selektivnim svojstvima, dizajniran za izolaciju patogenih bakterija iz roda Salmonella (lat. Salmonella). Vrlo je efikasan ako je potrebno otkriti ovaj patogen među ostalim predstavnicima crijevne mikroflore. Medij se koristi i za kliničku dijagnostiku i za sanitarne svrhe u ispitivanju hrane.
Opšte karakteristike
Selenite bujon se priprema na bazi praha, koji je homogenizovana mešavina različitih komponenti sastava. Boja suvog materijala može biti svijetložuta ili krem, ovisno o vrsti medija. Puder ima svojstva slobodno teče.
Gotova selenit supa je tečni providni medij svijetlo žute boje. Ova masa se sipa u posude u kojima se vrši setva radi dalje inkubacije.
Postoje tri glavne vrste selenitnog bujona:
- čisti medij - pogodan za izolaciju salmonele iz kliničkog i sanitarnog materijala;
- sa dodatkom manitola (dvokomponentni bujon) - dizajniran za rad samo s kliničkim materijalom;
- cistein-selenitni medij - može se koristiti za izolaciju salmonele iz patološkog biomaterijala pacijenta (izmet, urin, itd.).
Ovi tipovi se malo razlikuju po sastavu i karakteristikama akcije.
Glavni zadatak selenitnog bujona je da promoviše nakupljanje salmonele, inhibirajući rast prateće mikroflore. To omogućava ne samo otkrivanje patogena u materijalu, već i njegovo naknadno prenošenje u agar. Medij je razvio Leifler, koji je prvi otkrio selektivni efekat selenita protiv salmonele.
Kompozicija
Selenite bujon sadrži:
- kazein hidrolizat;
- laktoza;
- natrijum fosfat;
- natrijum hidroselenit.
Selenit-cistein medij, pored ovih komponenti, sadrži L-cistein i natrijum hidrogen fosfat. Sastav juhe od manitola razlikuje se po tome što umjesto hidrolizata kazeina uključuje peptičku probavu životinjskog tkiva. U takvom okruženju nema laktoze, ali ima manitola. Potonji djeluje kao supstrat koji se može fermentirati i osigurava puferska svojstva čorbe.
Sve komponente praha, osim natrijum hidroselenita, uslovno se nazivaju dio A, a selektivna supstanca dio B.
Princip rada i svojstva okoline
Selenite bujon radi kao medij za pohranusa selektivnim delovanjem. Selektivni učinak je postignut zbog toksičnosti selenita, koji inhibira rast većine mikroorganizama. Istovremeno, bakterije iz roda Salmonella mogu obnoviti ovo jedinjenje, čime se eliminira toksični učinak na vlastite stanice. Međutim, kao rezultat reakcije nastaje lužina koja smanjuje štetan učinak selenita na rast povezane mikroflore, te je stoga potrebno stabilizirati pH. Ovu funkciju obavljaju bakterije koje fermentiraju laktozu sa stvaranjem kiseline. Puferiranje medijuma je obezbeđeno fosfatom.
U dvokomponentnom bujonu, pH se stabilizuje manitolom. Cisteinski medij poboljšava selektivni učinak protiv salmonele. Takva juha je efikasna za kontrolu infektivne pozadine kod pacijenata sa neakutnim stadijumom bolesti ili rekonvalescenta.
Manifestacija karakteristika rasta referentnih sojeva u podlozi može se uočiti nakon 12-24 sata od početka inkubacije. U ovom slučaju, salmonela formira bezbojne kolonije.
Funkcije kuvanja
Priprema medijuma se vrši u dve faze. Prvo se pravi rastvor sa selektivnom komponentom u količini od 4 grama natrijum selenita po litru destilovane vode. Zatim dodajte 19 grama glavnog praha (dio A). Rastvor se dobro promeša i zagreva dok se čestice potpuno ne otope, nakon čega se sipa u sterilne epruvete.
Prilikom kuhanja važno je pratititemperaturni režim, jer je medij nestabilan na pregrijavanje. Sterilizacija juhe može se obaviti samo u vodenom kupatilu ili koristiti mlaz pare. Autoklaviranje medijuma je strogo zabranjeno.
